强肝胶囊对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1和PDGF-BB的影响

肝胆相照

　　

　　一、强肝胶囊可多靶点、多途径治疗脂肪性肝病

　　在多种慢性肝损伤病因的作用下，转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)、白细胞介素1等细胞因子的分泌增加。这些因子会引起肝组织的炎症反应，促使肝星状细胞(HSC)活化为肌成纤维细胞(MFB)，MFB迁移到损伤部位并分泌大量细胞外基质(ECM)。同时，基质金属蛋白酶的活性受到抑制，ECM的降解受限。最终肝组织内ECM的生成和降解失衡，导致大量的ECM在肝脏内沉积，形成肝纤维化。传统的中药制剂因多成分、多靶点和副作用小，在抗纤维化治疗方面发挥巨大作用。强肝胶囊作为一种中成药制剂，包含茵陈、当归、白芍、丹参等16种成分，具有清热利湿、补脾养血、益气解郁功效，用于慢性肝炎导致的肝纤维化和早期肝硬化、非酒精性脂肪性肝病、酒精性脂肪性肝病等疾病的治疗[1]。

　　由《中西医结合肝病杂志》发表，庄辉教授团队对强肝胶囊在抗肝纤维化的作用机制进行研究，现将结果总结如下。

　　二、研究分组

　　36只Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组、每组12只，模型组和治疗组大鼠腹腔注射40%CCl4(2ml/kg)，对照组大鼠腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液，每周2次，共6周。从建模的第4周开始，治疗组大鼠用强肝胶囊溶液(浓度为0.1g/ml，5ml/kg)灌胃，其他两组大鼠用等量的0.9%氯化钠溶液灌胃，每天1次,共6周。第3周末和第6周末各组6只大鼠采血，第9周末全部大鼠采血，检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平。第9周末时采集肝组织，经HE染色、Masson染色和α-SMA免疫组织化学染色后进行病理诊断；用荧光定量PDR和蛋白印迹方法检测肝组织目的因子mRNA和蛋白表达水平。

　　三、研究结果

　　3.1强肝胶囊减轻了CCl4对大鼠肝脏和脾脏等脏器的损伤作用

　　

　　强肝胶囊治疗组大鼠肝脏和脾脏边缘较锐利，质地较软。大鼠的肝重、脾重及肝脏指数和脾脏指数均较模型组有降低的趋势。

　　3.2强肝胶囊有效改善大鼠肝功能指标

　　

　　强肝胶囊治疗3周时，治疗组大鼠ALT和AST水平分别较模型组下降27.90%和22.94%，表明强肝胶囊具有保护肝组织、减少肝损伤的作用。

　　3.3强肝胶囊显著抑制了CCl4诱导的肝纤维化

　　

　　HSC激活过程是肝纤维化发生和发展的中心事件，HSC激活后形成MFB，启动细胞内α-SMA大量表达。本研究通过对肝组织切片进行α-SMA免疫组织化学染色来评估HSCs的激活程度。强肝胶囊治疗6周后，治疗组大鼠肝组织中HSC激活程度较模型组显著降低，表明强肝胶囊通过抑制HSC的激活发挥抗肝纤维化的作用。

　　3.4强肝胶囊下调细胞因子TGF-β1/Smads信号通路以及PDGF-BB表达

　　

　　强肝胶囊治疗组大鼠的TGF-β1mRNA和蛋白表达水平及其信号通路Smad2 /Smad3 mRNA表达水平均显著低于模型组，表明强肝胶囊通过抑制TGF-β1 /Smad2 /Smad3信号通路的表达发挥了抗肝纤维化作用。

　　四、强肝胶囊显著抑制肝纤维化

　　肝纤维化患者如果得不到有效治疗干预，将最终发展为肝硬化、肝衰竭、肝细胞癌。除针对病因的抗肝纤维化治疗，如抗病毒治疗外，专门针对肝纤维化的治疗领域目前尚无西药上市。但我国传统中药因具有多成分、多靶点、安全性高的优点，在防治肝纤维化方面疗效显著。强肝胶囊显著抑制了CCl4诱导的大鼠肝纤维化，改善大鼠肝功能，其可能作用机制为下调细胞因子 TGF-β1/Smads信号通路和 PDGF-BB表达，从而抑制HSC激活、增殖，发挥抗纤维化作用。

　　参考文献：

　　[1]王林,闫海江,曹曦等.强肝胶囊对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1和PDGF-BB的影响[J].中西医结合肝病杂志,2020,30(04):341-345+386.